簡(jiǎn)介
鏈霉親和素(Streptavidin, SA)是由鏈霉菌分泌的一種大約55 kDa的蛋白,生物素(Biotin)是分子量?jī)H244的小分子。SA和Biotin具有非常獨(dú)特的親和性,其解離常數(shù)Kd≈10?14 mol/L,甚至高于抗原-抗體,是自然界中最強(qiáng)的非共價(jià)連接之一。它們形成的復(fù)合物非常穩(wěn)定,可以像“生物膠水”一樣將需要偶聯(lián)、固定的分子、標(biāo)簽或支持物連接在一起,方便而不易解離,因而廣泛用于生物學(xué)研究中。
應(yīng)用舉例
Biotin分子量很小,對(duì)被標(biāo)記的抗體或蛋白構(gòu)象影響幾乎可以忽略,保持了抗體或蛋白的天然活性。用多種生物素標(biāo)記抗體與血液樣本作用后,利用偶聯(lián)有SA的磁珠可結(jié)合標(biāo)記抗體,這常用于磁珠法對(duì)特定細(xì)胞進(jìn)行負(fù)選的實(shí)驗(yàn)中;
細(xì)胞結(jié)合biotin標(biāo)記抗體后,可利用包被SA的熒光膠珠進(jìn)行細(xì)胞分選;
Biotin標(biāo)記的抗體或蛋白還可以偶聯(lián)在包被SA的基片上,制成抗體或蛋白芯片;
利用SA標(biāo)記熒光素,可與biotin標(biāo)記的抗體結(jié)合,這樣就形成了一個(gè)帶熒光標(biāo)簽的抗體。這樣可以方便地選擇和更換不同的SA標(biāo)記產(chǎn)品對(duì)抗體進(jìn)行標(biāo)記,而不需購(gòu)買(mǎi)許多標(biāo)記抗體;
Biotin標(biāo)記的蛋白或小分子可用于研究蛋白-蛋白、蛋白-小分子相互作用,比如用于IP實(shí)驗(yàn)中;
Biotin還可以標(biāo)記DNA,用于研究轉(zhuǎn)錄因子。
注意事項(xiàng)
天然樣本中可能會(huì)含有內(nèi)源性biotin,在IHC等實(shí)驗(yàn)中可能造成假陽(yáng)或高背景,應(yīng)用封閉或高溫法消除;
高濃度SA在中性條件下可能會(huì)聚沉,尤其當(dāng)溶解凍干品時(shí)。可考慮使用偏堿性(pH8.5)溶液制備為2×工作液。
Bioss鏈霉親和素標(biāo)記產(chǎn)品
貨期
包括定制標(biāo)記在內(nèi)所有產(chǎn)品7-10天內(nèi)發(fā)貨,新鮮制備以保證熒光產(chǎn)品在用戶(hù)手中更長(zhǎng)的有效期;
小分子多肽和化合物因分子量較小,標(biāo)記和純化需要特殊處理,價(jià)格和標(biāo)記周期根據(jù)樣品特性而定。