抗原抗體
定義:是一類在適合條件下能激發(fā)機體免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應答,并能與免疫應答產生的效應物質(抗體和效應細胞)在體內或體外發(fā)生特異性結合反應的物質。
抗原具有兩種性能:
(1)免疫原性(immunogenicity) 指抗原分子具有誘導機體產生免疫應答的特性。
(2)反應原性(reactogenicity)指抗原分子與抗體或效應 T 細胞等免疫應答產物發(fā)生特異性反應的特性。
免疫原:在具有免疫應答能力的機體中,能使機體產生免疫應答的物質稱為免疫原(immunogen),故抗原物質又可稱為免疫原(半抗原不是免疫原)。
抗原的分類:
一. 免疫學分類:
(1)完全抗原、半抗原;
(2)胸腺依賴抗原與非依賴抗原。
二. 臨床分類:
(1)外源性抗原:微生物、花粉等;
(2)內源性抗原:隱蔽的自身抗原、腫瘤相關抗原等;
(3)同種異型抗原:人類白細胞抗原、血型抗原;
(4)異嗜性抗原:人與其他動物、植物等之間存在的共同抗原。
多種物質都可以作為抗原,其中蛋白質是最主要的抗原。半抗原也屬于人工抗原,或稱為不完全抗原。它本身不具有免疫原性,它必須與某種載體蛋白偶聯(lián)才能表現(xiàn)免疫原性。
抗原決定簇
抗原決定簇(antigenic determinant) 指抗原分子表面具有特殊立體構型和免疫活性的化學基團。由于抗原決定簇通常位于抗原分子表面,因而又稱為表位(epitope)。 抗原決定簇決定著抗原的特異性,即決定著抗原與抗體發(fā)生特異結合的能力。抗原決定簇多位于蛋白質的表面,一個蛋白質大分子常有許多抗原決定簇。
構象決定簇(conformational determinants),又稱為不連續(xù)決定簇(discontinuous determinants),抗原分子中由分子基團間特定的空間構象決定的決定簇,一般是由分子中不連續(xù)的若干肽鏈盤繞折疊而構成。
順序決定簇(sequential determinants),又稱為連續(xù)決定簇(continuous determinants),抗原分子中直接由分子基團的一級結構序列決定的決定簇。
一般來講,二種決定簇都依賴于多肽鏈上的某一段氨基酸序列,空間構象也是由一級序列決定的。因此決定簇都依賴于空間構象和氨基酸序列兩種因素。
抗體
抗體(antibody,Ab):是指由漿細胞(PC)合成和分泌的,能與Ag進行特異性結合的糖蛋白。
免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig): 具有抗體活性,或者在結構上與Ab 相似的球蛋白。抗體是一類免疫球蛋白。
抗體是機體對抗原物質產生免疫應答的重要產物,具有各種免疫功能,主要存在于動物的血液(血清)、淋巴液、組織液及其它外分泌液中,因此將抗體介導的免疫稱為體液免疫(humoral immunity)。
抗體是具有4條多肽鏈的對稱結構,其中2條較長、相對分子量較大的相同的重鏈(H鏈);2條較短、相對分子量較小的相同的輕鏈(L鏈)。鏈間由二硫鍵和非共價鍵聯(lián)結形成一個由4條多肽鏈構成的單體分子。輕鏈有κ和λ兩種,重鏈有μ、δ、γ、ε和α五種。 整個抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在給定的物種中,不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列。可變區(qū)位于"Y"的兩臂末端。在可變區(qū)內有一小部分氨基酸殘基變化特別強烈,這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū)。高變區(qū)位于分子表面,最多由17個氨基酸殘基構成,少則只有2 ~ 3個。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結合抗原抗原的特異性。一個抗體分子上的兩個抗原結合部位是相同的,位于兩臂末端稱抗原結合片段(antigen-binding fragment, Fab)。"Y"的柄部稱結晶片段(crystalline fragment,FC),糖結合在FC 上。
功能區(qū)的作用:
(1)VL和VH:結合抗原決定簇(FV區(qū))
(2)CL和CH:具有同種異型的遺傳標記
(3)CH2:結合補體
(4)CH3:結合Fc受體
抗原結合點由L鏈和H鏈超變區(qū)組成,與相應抗原上的表位互補,借助靜電力,氫鍵以及范德華力等次級鍵相結合。
免疫應答
抗原刺激機體產生相應的抗體,抗體的產生過程即為體液免疫應答過程。
體液免疫應答的主要組織部位是淋巴結、脾臟和粘膜下淋巴組織等外周免疫器官,外來抗原進入機體后即被補體致敏或者被DC吞噬,然后隨淋巴液進入引流淋巴結。淋巴濾泡中的FDC通過其表面的補體受體捕獲被致敏的外來抗原,激活B細胞。位于脾髓質交界區(qū)的DC則為T細胞呈遞外來抗原肽,啟動獲得性免疫應答,B細胞在外周成熟、發(fā)育過程的最后階段是成為專門的合成和分泌抗體分子的漿細胞。漿細胞高爾基體發(fā)達、代謝活躍,但沒有繼續(xù)分裂、增殖的能力,也不參與抗原遞呈。他們寄居在脾臟或者骨髓中,集中所有的能量生產并分泌抗體分子。抗體分子的重鏈和輕鏈在內質網上合成、組裝后經高爾基體運輸至細胞表面并分泌于胞外。一個漿細胞每秒鐘能分泌5000個抗體分子,在外周的漿細胞壽命僅為幾天,但是骨髓中的漿細胞壽命可能較長。
初次體液免疫是指宿主第一次接觸外來TD抗原后血清中逐漸出現(xiàn)抗原特異性抗體的過程。初次體液免疫應答的延遲相(從抗原免疫到抗體水平達到高峰的時間)為6-10天,起初幾天血清中的抗原特異性抗體主要為親和力較低的IgM,后期以IgG為主。初次應答過程的血清中抗原特異性抗體的高峰濃度較低且維持時間較短。再次體液免疫應答是指曾被某抗原免疫過的宿主再次接觸該抗原時血清中迅速出現(xiàn)抗原特異性抗體的過程,其延遲相僅為4-5天,血清抗體以IgG為主,其高峰濃度較高且維持時間較長。再次應答所產生的抗體還有親和力成熟現(xiàn)象,即該抗體與抗原的親和力明顯高于初次應答產生的抗體。
免疫應答過程:
1.抗原進入機體;
2.抗原刺激 B淋巴細胞,使之分化增殖成為抗體分泌漿細胞和記憶細胞(初次免疫應答);
3.抗體主要由漿細胞分泌 ;
4.記憶細胞再次受到特異性抗原刺激后會被激活而成為分泌抗體的漿細胞(再次免疫應答);
5.記憶B細胞是長命細胞,可以存活數(shù)月甚至機體終生 。
抗原抗體反應
一、抗原抗體反應特點
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結合;
2.可逆性:抗原與抗體結合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質的含量時,化學比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應法相仿。
二、影響抗原抗體反應的因素
1.電解質 :抗原抗體特異結合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質影響,如有適當濃度的電解質存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應最適溫度。